锐赛生物

靶标发现与功能验证基因操作和基因组编辑药物靶标开发生化/细胞水平验证高通量高内涵分析GPCR/核受体亚博电竞唯一官网激酶亚博电竞唯一官网体外药理学体外安全性评价药代动力学毒理学评价药代动力学/毒理学抗肿瘤药理评价代谢类和心脑血管疾病药理评价中枢神经系统药理评价炎症/自身免疫疾病药理评价体内药理学立项成果展示肿瘤个性化治疗项目QPCRWB亚博电竞唯一官网ELISA亚博电竞唯一官网甲基化亚博电竞唯一官网SNP亚博电竞唯一官网高效液相色谱法(HPLC)蛋白质谱基因芯片核酸、蛋白分析服务目的基因的ORF克隆化学合成质粒载体构建siRNA的细胞转染及筛选技术服务shRNA载体构建及筛选技术服务RNAi病毒包装及筛选技术服务miRNA的表达载体构建及病毒包装载体构建及筛选服务chipchip-seqIPCO-IPRNA免疫共沉淀(RIP)RNA pull down免疫共沉淀实验服务慢病毒包装腺病毒包装细胞培养原代细胞分离干细胞诱导分化CCK-8亚博电竞唯一官网流式周期亚博电竞唯一官网流式凋亡亚博电竞唯一官网流式分选细胞流式鉴定细胞表面抗体活性氧(ROS)亚博电竞唯一官网线粒体膜电位亚博电竞唯一官网transwell亚博电竞唯一官网管腔形成实验细胞黏附实验细胞克隆形成实验细胞免疫荧光亚博电竞唯一官网稳转株构建双荧光素酶亚博电竞唯一官网细胞干性成球能力磁珠分选细胞MDA(丙二醛)亚博电竞唯一官网酶活动力学亚博电竞唯一官网HDA亚博电竞唯一官网细胞实验服务常规化学染色免疫组化(IHC)免疫荧光(IF)原位杂交(ISH)荧光原位杂交(FISH)原位末端标记染色(TUNEL)组织样本处理拍照处理病理学亚博电竞唯一官网服务裸鼠皮下成瘤(CDX模型)人源肿瘤移植模型(PDX模型)糖尿病/肥胖模型心血管类疾病模型肾脏疾病模型肝脏疾病模型炎症与自身免疫疾病模型呼吸系统疾病模型其他疾病模型动物实验服务2019精品SCI2018精品SCI2017精品SCI往期精品SCI漂亮SCI案例库科研转化成果u.cad癌症筛查亚博电竞唯一官网全外显子组基因亚博电竞唯一官网其他疾病基因亚博电竞唯一官网生物信息数据分析服务肿瘤学领域研究平台病理学中心实验室心血管与代谢领域疾病研究平台炎症与自身免疫疾病领域研究平台特发肺纤维化疾病领域研究平台抗体药物一体化临床前研发平台药性评价平台公司新闻价值金字塔三元悖论为客户赢得荣誉诚觅英才内部推荐加入我们留言板联系我们推荐朋友SCI论文发表奖励制度科研资助POLOdeliverer3000CCK-8Annexin V-FITCAnnexin V-RFPECL 发光液细胞周期与凋亡亚博电竞唯一官网自研试剂基因质粒病毒免费送细胞库动物饲料促销活动
CCK-8 细胞增殖与毒性亚博电竞唯一官网试剂盒

产品简介

  • CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度亚博电竞唯一官网试剂盒。

  • WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂1-MethoxyPMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan) (1)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

  • 1. WST-8 分子结构式及其亚博电竞唯一官网原理

    产品优势:

    本试剂盒提供了一种灵敏度高、操作简便、使用安全的细胞增殖与毒性亚博电竞唯一官网方法。与传统的 MTT 实验相比具有明显的优势:

  • CCK-8 法是用于细胞因子等诱导的细胞增殖亚博电竞唯一官网,也可以用于抗癌药物等对细胞有

  • 毒试剂诱导的细胞毒性亚博电竞唯一官网,或一些药物诱导的细胞生长抑制亚博电竞唯一官网等与细胞活性和增殖相关的实验的一种高灵敏度,无放射性的比色亚博电竞唯一官网法

  • CCK-8 法对细胞无毒性,可以多次测定选取最佳测定时间 ,与 MTT 方法相比线性范围更宽,灵敏度更高

  • CCK-8 溶液不需配制,可以直接加入到细胞样品中,即开即用,比 MTT 更加稳定

  • 实验结果重复性好,适合大规模,高通量的样品亚博电竞唯一官网

  • MTT 实验生成的 formazan 不是水溶性的,需要使用 DMSO 等有机溶剂溶解而本方法产生的 formazan 是水溶性的,不仅省去了溶解步骤,更因此而减少了该操作步骤带来的误差

  • 产品包装:

    产品货号

    规格

    数量

    D002-1

    50

    0.5ml×1

    D002-2

    500

    1ml×5

    D002-3

    10000

    25ml×4


    贮藏条件:

    CCK-8 溶液在避光、0-5°C的条件下可以保存 1 年,若长期不用可在-20°C下避光保存 2 年。建议分装后保存于-20°C,使用时提前于 4°C解冻,请避免反复冻融,否则增加背景值,干扰实验结果。


    所需的设备及耗材:

  • 10ul100-200 ul 以及多通道移液器

  • 酶标仪(带有 450 nm 滤光片)

  • 96 孔培养板

  • CO2 培养箱


  • 使用方法:

    1. 96孔板中接种细胞悬液(100ul/),通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞,细胞毒性实验每孔约5000个细胞,具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素决定)

    2. 按照实验需要,进行培养并给予0-10ul特定的药物刺激,处理一段适当的时间 (例如:6,12, 2448小时)

    3. 每孔加入10ul CCK-8溶液。如果起始的培养体积为200ul,则需加入20ul CCK-8溶液,以此类推。可以用加相应量细胞培养基和CCK-8但不加细胞的孔作为空白对照,若担心所使用的药物会干扰亚博电竞唯一官网,需设置加相应量细胞培养液、药物和CCK-8溶液但不加细胞的孔作为空白对照。

    4. 在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,具体时间可以通过预实验确定。预实验时可以在0.5124小时后分别用酶标仪亚博电竞唯一官网,然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实验。

    5. 用酶标仪测定在450 nm处的吸光值,若无450nm滤光片,可以使用420-480nm的滤光片。如果样品为高浑浊度的细胞悬液,可以使用大于600nm的波长,例如650nm,作为参考波长进行双波长测定。

    6. 如果需要暂时不测定O.D值,可以向每孔中加入10ul 0.1M HCl溶液或者1% w/vSDS溶液,避光保存在室温,24小时内吸光度不会发生变化。

    注意事项:

    1. 使用 96 孔板进行亚博电竞唯一官网时,如果细胞培养时间较长,请注意蒸发问题。可将 96 孔板外围一圈加培养基、水或 PBS 保湿。同时,可以把 96 孔板置于培养箱内靠近水盘的位置以缓解蒸发。

    2. 培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而不同。在正式实验前,建议先做预实验摸索铺板的细胞数量以及加入 CCK-8 试剂后的培养时间。

    3. 铺板时请注意保证每个孔细胞数量均匀,建议铺板过程中注意时常混匀,防止因细胞沉淀造成不均匀。加入 CCK-8 后请前后左右轻轻晃动培养板数次,使培养基 和CCK-8 溶液充分混匀。

    4. 本试剂盒的亚博电竞唯一官网依赖于脱氢酶催化的反应,如果待测物质有氧化性或还原性,可在加 CCK-8 之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。若药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

    5. 加入 CCK-8 时,如果细胞培养时间较长,培养基颜色或 pH 值已变化,建议换用新鲜的培养基。

    6. 用酶标仪亚博电竞唯一官网前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。

    7. 本试剂盒系无菌灌装生产。在使用过程中,请在生物安全柜内无菌操作,避免污染。

    8. 为了您的健康和安全,请穿着实验服并戴一次性手套或乳胶手套操作。

    参考文献:

    1. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferationand cytotoxicity assays. Mosmann T (1983).Journal of Immunological Methods. 65:55–63.

    2. A highly water-soluble disulfonated tetrazolium salt as a chromogenic indicator forNADH as well as cell viability,Talanta,44, 1299-1305, 1997.

    3. A Vital Role for Ape1/Ref1 Protein in Repairing Spontaneous DNA Damage in HumanCells, Molecular Cell, 17, 463-470, 2005.

    4. 4. Efficacy of RNAi-induced down-regulation of wild-type FLT3 on NF-kB pathway inTHP-1 cell line. Lu J, Yue BH, Wang CM, Bai ST, Sheng GY. Life Science Journal.Vol.5,No.2, 2008.

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